Assisted Reproduction Techniques (ART) har utviklet seg det siste tiåret for å forbedre suksessratene i IVF-teknikker. Med introduksjonen av Preimplantation Genetic Testing (PGT) ble en ny teknikk født i laboratorier - embryobiopsi.
Embryobiopsiteknikker blir alltid bedre, og har blitt tryggere og mer pålitelige. Verktøyene og teknologiene for genetiske studier har endret seg og er erstattet av mer komplekse og nøyaktige teknikker. Disse endringene inkluderer måten biopsi utføres på, så vel som stadiet av embryoutvikling der biopsien utføres.
For å utføre PGT-testingen må vi hente genetisk materiale fra embryoet for analyse. En biopsi er nødvendig, og denne prosedyren består av fjerning av celler som vil bli diskutert i denne artikkelen.
PGT og embryobiopsiteknikker gjør oss i stand til å gå videre til IVF med tillit til at vi har valgt de beste embryoene for en vellykket graviditet uten genetiske abnormiteter og sykdommer.
Hva er PGT?
PGT er en genetisk test utført i embryoer for å screene for kromosomavvik eller arvelige sykdommer. Unormale embryoer identifiseres og embryolegen kan velge genetisk normale embryoer for overføringen.
Avhengig av pasientens sykehistorie, vil det beste alternativet for PGT bli valgt til fordel for pasienten.
Preimplantasjons genetisk testing for aneuploidi (PGT-A): testing for unormalt kromosomtall. Denne testen analyserer de 46 kromosomene for å se etter ekstra eller manglende kromosomer, for eksempel Downs syndrom (tre kopier av kromosom 21).
Preimplantasjonsgenetisk testing for monogene lidelser (PGT-M): testing av arvelige genetiske forhold i familien for å unngå å overføre det til babyen, inkludert kjønnsrelaterte sykdommer (f.eks. Cystisk fibrose eller Huntingtons sykdom). Forberedelsestester som blod eller spyttprøver kan være nødvendig før PGT-M-syklusen.
Preimplantasjonsgenetisk testing for strukturelle kromosomale omorganiseringer (PGT-SR): genetisk test utført for å screene hvis embryoet har kromosomer arrangert unormalt eller ikke har riktig størrelse. Dette er forårsaket av balanserte translokasjoner og inversjoner i kromosomene. Kromosomomorganiseringer kan arves eller skje spontant.
Hva skjer i laboratoriet?
Biopsiprosedyre
Gjennom årene har biopsiteknikken utviklet seg. Det var vanlig å utføre biopsi på dag 3 av embryoutvikling, når embryoet er i cellestadium.
Flere vanskeligheter oppstår ved å utføre biopsi på cellestadiet. Hvis cellen lyser under prosedyren, må en annen celle fjernes. Det er en mer invasiv metode for embryoer på dag 3, da det er åtte celler tilstede i de beste tilfellene.
Ikke bare byr teknikken på utfordringer, men også resultatene. Dette er fordi vi kun kjenner kromosominformasjonen til én celle. Risikoen er lavere og resultatene mer pålitelige med blastocyststadiet. Embryoer som har nådd blastocyststadiet foretrekkes for tiden for embryobiopsi (på dag 5 eller 6, noen laboratorier til og med dag 7, etter inseminering).
Blastocysten består av to typer celler, polariserte celler blir trophectoderm, som danner morkaken, og apolare celler blir til den indre cellemassen, som utvikler seg til babyen. Trophectoderm er cellelaget som utgjør veggen til blastocysten; cellene i trophectoderm er de vi får fra biopsien for den genetiske studien.
Blastocystbiopsi har den fordelen at det har et større antall trophectoderm-celler. Derfor studeres en gruppe celler; vi innhenter mer informasjon sammenlignet med biopsien på dag 3. Trofektodermen til en blastocyst av god kvalitet har mange celler, mellom 100-300 celler. Vi trenger 5-10 celler for den genetiske studien. Ettersom trophectoderm har et godt antall celler; dette er ikke skadelig for embryoet.
Fjerning av trophectoderm-cellene er mulig uten å påvirke den indre cellemassen som den fremtidige babyen senere utvikler seg fra. Ved å oppnå rundt det antallet celler, vil vi kunne oppnå et resultat som vil indikere den fullstendige kromosomtilstanden til embryoet. Det er viktig at embryoet er av god kvalitet for å kunne få det antallet celler og embryoet kan fortsette å utvikle seg etter hensikten. For embryobiopsi gjøres et lite snitt (assistert klekking) i zona pellucida som dekker embryoet, på dag 3 av utviklingen. Dette gjør det lettere for blastocysten å klekkes fra sonen og letter biopsien.
Noen laboratorier utfører den assisterte klekkingen samme dag som biopsien. Dette avhenger av rutineprotokollen som brukes i laboratoriet, eller på embryologen, begge metodene er trygge.
På den annen side gjennomføres en uttømmende opplæring av embryologen. En kvalifisert embryolog vil utføre biopsien, og muligheten for å skade embryoet er minimal.
Imidlertid er det alltid en viss risiko for at skader på embryoet kan oppstå under prosedyren. Dette er fordi det fortsatt er en invasiv teknikk, men med god embryokvalitet og riktige hender minimeres risikoen.
En av begrensningene ved blastocystbiopsi er at mange embryoer ikke vil nå blastocyststadiet, men forbedringer i kulturforholdene økte antallet blastocyster i IVF-sykluser. Et godt antall blastocyster vil ha større sjanse for å oppnå normal/euploide embryoer.
Slangeprosedyre
Når biopsien er utført, fortsetter embryologen med slangen. Dette er en veldig grundig teknikk som vi må jobbe med i et strengt sterilt område, og sørge for at alt vi skal bruke er rent for eksternt DNA, for å unngå kontaminering.
Både embryobiopsi og slangetrinn krever alltid en annen person som vitne for å sikre at antall oppnådde embryoer og celler er korrekt i alle trinn.
Når vi først har cellene i de tilsvarende rørene, oppbevares de i fryseren, venter på å bli sendt til eksternt laboratorium, eller analyseres i selve klinikken hvis det finnes et eget genetikklaboratorium. Prøvene sendes med opprettholdelse av temperaturen og transporteres så raskt som mulig til eksternt laboratorium.
Avhengig av laboratoriet kan resultatene mottas i et intervall på 2-3 uker.
Embryovitrifisering
Frysingen av blastocystene (vitrifikasjonsteknikk) utføres; embryoene fryses mens de venter på resultatene. Når resultatene kommer til laboratoriet, og hvis vi har minst et euploid embryo, kan klinikken begynne å planlegge den frosne embryooverføringen. Det euploide embryoet vil bli tint og overført som en vanlig frossen embryooverføring.
Vi kan ha to scenarier når vi bestemmer oss for å utføre embryobiopsien. Biopsi på embryoer hentet fra en ny syklus, eller embryoer som vi allerede har frosset ned og vi ønsker å vite deres genetiske status. Det andre alternativet krever tining, utførelse av biopsi og frysing av embryoene igjen. Dette alternativet vil avgjøres basert på pasientens historie og kvaliteten på de frosne embryoene.
Hvilke resultater kan vi finne?
Resultatene sendes med informasjon om de biopsierte embryoene og deres genetiske status.
Euploide embryoer: kromosomalt normalt med 46 kromosomer i 23 par. Målet er å overføre ett euploid embryo som vil ha størst sjanse til å bli en sunn baby.
Aneuploide embryoer: kromosomalt unormale embryoer som ikke har riktig antall kromosomer, de kan føre til økte forekomster av spontanaborter, fødselsskader og IVF-svikt. Avhengig av antall involverte kromosomer, kan det være komplekst unormalt eller kaotisk.
Mosaikk embryoer: En prøve rapporteres som 'mosaikk' hvis en betydelig andel, men ikke alle, av cellene som er tatt, viser seg å ha en kromosomavvik.
Embryoet har både normale og unormale celler. Mosaikk embryoer kan være enten lavt eller høyt nivå, avhengig av antall unormale celler. Noen lavmosaikk-embryoer kan overføres med unntak, i dette tilfellet anbefales det alltid å konsultere en genetisk spesialist.
Ingen resultat/Ingen DNA påvist: Det er mulig at laboratoriet ikke klarer å få et resultat. Dette kan skyldes en rekke faktorer, inkludert: dårlig embryokvalitet, degradert DNA, celler tapt under slangeprosedyren... I visse tilfeller kan re-biopsi av blastocyster av god kvalitet vurderes. Resultatene av PGT er svært nøyaktige; rundt 98 % avhenger av laboratoriet. Det er en høy prosentandel som kan være fordelaktig avhengig av pasientens sykehistorie.
konklusjonen
Embryobiopsi har blitt bedre gjennom årene, for å være en sikker og effektiv metode i laboratoriet. Blastocystbiopsien kan utføres trygt med en ekspert embryolog og et laboratorium forberedt for det.
Fordelene med denne teknikken tillater oss å kjenne det beste morfologiske og genetiske embryoet, og gir enda et alternativ til pasienter som kan trenge det.
De viktigste indikasjonene på PGT er fremskreden mors alder, gjentatt implantasjonssvikt, tidligere spontanaborter, alvorlig mannlig infertilitet og par som står i fare for å få en baby med en arvelig genetisk sykdom.
Avslutningsvis bør PGT integreres i ART for å tilby de beste resultatene til pasientene. Men alltid med hjelp fra spesialistene i klinikken for å ta den beste avgjørelsen i ditt spesielle tilfelle.
