Anya Hein, en embryolog i det ti personer store embryologiteamet ved ORM Fertility deler noen innsikter om den kritiske tiden pasientenes embryoer bruker på å vokse og utvikle seg i laboratoriet.
Når du velger en fruktbarhetsleverandør, er det en viktig del av prosessen å velge en du stoler på og føler deg komfortabel med. Pasienter fokuserer vanligvis på sin individuelle lege, men de får ikke alltid vite mer om embryologilaboratoriet og embryologiteamet som skal jobbe på deres vegne når de skal velge en fertilitetsleverandør.
Når pasienter lærer mer om IVF-prosessen, innser de den ekstremt avgjørende rollen som embryologilaboratoriet og teamet vil spille i deres reise til foreldreskap.
Hvert laboratorie- og embryologiteam har sine unike egenskaper som kan bidra til suksess, så det er nyttig for pasienter å få vite mer om denne delen av deres IVF-team og ha tillit til dem også.
Som embryolog, «Guardian of Embryos» som vi kaller oss selv i laboratoriet vårt, vet jeg at det kan virke som om vi ønsker å holde all magien som skjer i vårt lille laboratorium for oss selv.
Det pleier å være et slør av mystikk over hva som skjer i IVF-laboratoriet. Som pasient vil du sannsynligvis ikke møte en av oss når du starter syklusen din, og du møter oss kanskje ikke en gang på dagen for egguttak. En pasient lurer kanskje på; er det i det hele tatt noen embryologer der inne? Hva gjør de med kjønnscellene mine? Det er et betydelig trossprang at vi ber våre pasienter om å ha umåtelig tillit til oss når vi bryr oss om deres håp om å bli foreldre.
IVF-prosessen krever et nivå av følelsesmessig stress og enorm tålmodighet de fleste av oss ennå ikke har opplevd. For hvert trinn ber vi pasientene om å vente, vente igjen, og så vente igjen. Kanskje et lite innblikk i prosessen kan få hjertet til å føles litt lettere og lette byrden av all ventingen.
Det er viktig å huske at hver klinikk er forskjellig og deres suksessrater kan påvirkes av mange faktorer, ikke bare kvaliteten på deres embryologiske laboratorium og team. Imidlertid vil de generelle teknikkene og flyten av embryoene i hvert laboratorium være svært like.
Forberedelse til dag 0
En pasient, enten en kvinne som ønsker å bli gravid med sine egne egg eller en eggdonor, vil i omtrent 10-12 dager gå på spesifikke medisiner som er utviklet for å stimulere eggstokkene til å produsere så mange egg som mulig. Hver kvinne har en kohort av tilgjengelige "pre-egg" hver måned, kjent som follikler.
Mens naturlig nok bare én eller to av disse folliklene vil vokse til et modent egg og eggløsning, vil stimuleringen tillate de fleste av disse tilgjengelige folliklene å vokse, modnes og være tilgjengelige for inseminering i laboratoriet. Når folliklene har vokst til en ønsket størrelse, vil pasienten bli "utløst" for egguthenting, som er kjent som dag 0. Kjønnscellene (spermier og egg) vil være i embryologilaboratoriet fra dag 0 til og med dag 6 (blastocyststadiet) ).
Dag 0
På dagen for eggsamlingen vil eggene og sædcellene komme sammen. Dette kan skje på to forskjellige måter, intracytoplasmatisk spermieinjeksjon (ICSI) eller standard inseminasjon.
ICSI involverer fjerning av de putelignende cumuluscellene ved hjelp av et enzym kalt Hyaluronidase for å visualisere modenheten til hvert egg før injeksjon av sædcellene. Ved vår klinikk vil omtrent 90 % av tilfellene bruke ICSI for å maksimere antall befruktede egg og bidra til å bekjempe lavt antall sædceller og/eller motilitet.
Nivåene av modenhet av egget kan sees ned i mikroskopet når cumuluscellene er fjernet. De tre modningsgradene er definert som Germinal Vesicle (GV), som er den mest umodne, Metafase I (MI eller GVBD), og Metafase II (MII eller PB).
Bare når et egg ser ut til å ha en polarkropp (MII-stadium) tilstede, kan de befruktes. Det er veldig nyttig at egg viser oss når de er modne, slik at vi vet hvilke som er klare til å akseptere en sæd og muligens befrukte. I gjennomsnitt vil 75 % av de innsamlede eggene være modne.
Det er viktig å innse at alt som skjer i laboratoriet og i naturen er en prosess, ikke et øyeblikk. Når vi utfører ICSI, er det ikke umiddelbart kjent om disse eggene vil befrukte. Vi begynner ICSI og inseminering etter lunsjtid, og det er noe av det siste vi gjør på laboratoriet for dagen. Vi injiserer eggene, hvisker våre gode intensjoner og legger dem bort i deres varme rugemaskiner for natten. Ved å bruke nøyaktig timing og årvåken tålmodighet, har vi tro på at prosessen vil fortsette og magien vil skje mellom disse eggene og den sæden.
Standard inseminering innebærer at eggene som hentes blir delt mellom forskjellige dråper kulturmedier og deretter inokulert med ren, bevegelig sæd. Disse eggene vil ikke bli strippet for cumuluscellene, og derfor vil modenheten til dem ikke bli kjent før dagen etter, ved befruktningssjekk.
Dager 1-3
På dag 1, omtrent 16-18 timer etter at vi introduserte sædceller til eggene, sjekker vi hvor mange som har befruktet, og skiller de befruktede eggene fra de ubefruktede og de unormalt befruktede.
Befruktning er bare synlig for øynene våre i noen timer før embryoet vil begynne å dele seg. For de eggene som ble inseminert med standard inseminasjon, må vi først fjerne cumuluscellene før vi kan se befruktning. Hyaluronidase er et naturlig forekommende enzym i sædceller, så disse eggene skilles nå lett fra bunken etter en kveld med mye sæd.
Når vi ser ned i mikroskopet kan vi se to små kuler i eggene; som betegner de normalt befruktede fra resten. Disse små kulene kalles pronuclei; vi ser etter to av dem (2pn). Når vi ser to vet vi at det er både faderlig DNA (sperm) og mors DNA (egg) tilstede.
Vi forventer at ca. 75-80 % av de modne eggene befrukter normalt. Her ser vi igjen en reduksjon av egg fra antallet vi startet med; generelt færre egg enn follikler, færre modne egg enn totalt egg og nå færre befruktede egg (zygoter) enn inseminerte egg. Det er mange grunner til at egg ikke befruktes. Det kan være en eggfaktor på grunn av alder eller kvalitet, eller sædfaktorer som hindrer eggene i å befrukte, eller potensielt en kombinasjon av både egg og sæd.
Etter å ha sjekket for befruktning ønsker vi å sette dem tilbake i inkubatoren så raskt som mulig. Der inne trives og vokser de. Vi overlater dem til seg selv til dag 3.
Dager 3-4
På dag 3 vurderer vi embryoenes vekst til dette punktet. Hvis omfattende kromosomscreening (CCS) er planlagt, vil vi også klekke ut et lite hull i zona pellucida (skall) til hvert embryo. Embryoer vil naturlig klekkes ut av sonene før de implanteres i livmoren, så det er en vanlig del av deres fremgang; vi gir bare embryoene et lite tidlig dytt.
Denne assisterte klekkingen vil bidra til å gjøre biopsiprosessen enklere på dag 5/6. Omtrent 70-80 % av tilfellene ved vår klinikk bruker CCS. Når vi tar embryoene ut og flytter dem inn i det passende mediet for dette vekststadiet, graderer vi dem basert på antall celler, prosent fragmentering og symmetri.
Vi vil at embryoene skal være rundt 6-8 celler innen denne dagen. Embryoene begynner å skille seg fra hverandre på dette stadiet. Omtrent 95 % av de første embryoene vil fortsette å vokse til dag 3.
Dager 5-6
Neste gang vi ser på embryoene er på dag 5. Uten forstyrrelser, mellom dag 3 og dag 5, gjør embryoene den svært vanskelige overgangen fra et flercellet embryo i spaltningsstadiet til en morula.
På dag 5/6 gjør de overgangen fra en morula til en blastocyst.
Blastocysten er stadiet der differensiering begynner. På morulastadiet komprimerer embryoets celler og bestemmer hvilke celler blant dem som vil fortsette å dele seg og bli den indre cellemassen (ICM) og hvilke som skal bli trophectoderm. Dette er de avgjørende delene vi ser etter i embryoet på blastocyststadiet. ICM er den lille gruppen av celler i embryoet som blir babyen, og trophectoderm er den bikakeformede celler som omgir ICM som vil bli morkaken.
Når de har nådd dette stadiet, blir laboratoriemiljøet uegnet for videre vekst. Dag 5/6 er derfor dagene da disse embryoene enten overføres tilbake til en livmor, forglasses (en metode for rask avkjøling av embryoet, nødvendig for forlenget suspendert lagring), eller biopsiert for CCS-testing og deretter forglasset. Som med alle ting i naturen, vokser ikke alle embryoer i samme hastighet. Det er en rekke vekst som er akseptabel; derfor ser vi etter de samme tegnene på levedyktighet og vekst på dag 6 som vi gjør på dag 5.
På grunn av det høye energinivået og "perfeksjonen" som kreves for å vokse fra et embryo i spaltningsstadiet til en blastocyst, observerer vi i gjennomsnitt bare omtrent halvparten av de levedyktige dag 3-embryoene utvikle seg til dag 5/6. Noen embryoer kan vokse til blastocyststadiet, men er ikke av sterk nok kvalitet til å bli overført eller biopsiert.
Det kan være mange grunner til at embryoene ikke fortsetter å vokse til dag 5/6; spermfaktor, eggfaktor, mangel på tilstrekkelig mitokondriell energi eller kromosomavvik, listen fortsetter og fortsetter. Uansett hva faktoren kan være, når vi ser at egg faller ut og deretter embryoer faller ut, er det en abnormitet i egget eller embryoet som hindrer det i å fortsette i prosessen. Selv med de perfekte forholdene, kan de mangle de interne mekanismene for å fortsette å trives. Og det er veldig viktig å huske at disse embryoene ikke ville lage en baby.
Gjennom IVF-prosessen må man huske at follikler ikke er lik egg, egg er ikke lik zygoter, zygoter er ikke lik blastocyster, og blastocyster er ikke lik graviditet. Hver syklus vil være forskjellig, og det kan uten tvil være ekstremt frustrerende for pasienter å være i en situasjon der de har liten kontroll. Det kan være nyttig å gå i behandling med rimelige forventninger, i det minste en grunnleggende forståelse av embryologisk prosess, og et blikk mot det større bildet. Sluttmålet er en sunn baby, og hver sunn baby krever bare ett normalt embryo som har fått en omsorgsfull start.
Vær trygg på at uansett hvor lang eller kronglete reisen din kan være, vil embryologiteamet ditt være der for å ta vare på embryoene dine med en dyktig hånd og et ømt hjerte, klar til å holde deg stødig ved enhver støt på veien.
