Az asszisztált reprodukciós technikák (ART) az elmúlt évtizedben fejlődtek, hogy javítsák az IVF technikák sikerességi arányát. A Preimplantation Genetic Testing (PGT) bevezetésével egy új technika született a laboratóriumokban – az embrióbiopszia.
Az embrióbiopsziás technikák folyamatosan fejlődnek, biztonságosabbá és megbízhatóbbá váltak. A genetikai vizsgálat eszközei és technológiái megváltoztak, és felváltották őket bonyolultabb és pontosabb technikák. Ezek a változások magukban foglalják a biopszia végrehajtásának módját, valamint az embriófejlődés azon szakaszát, amelyben a biopsziát elvégzik.
A PGT-vizsgálat elvégzéséhez genetikai anyagot kell nyernünk az embrióból elemzés céljából. Biopsziára van szükség, és ez az eljárás a sejtek eltávolításából áll, amelyet ebben a cikkben tárgyalunk.
A PGT és az embrióbiopsziás technikák lehetővé teszik számunkra, hogy abban a bizalomban folytassuk az IVF-et, hogy a legjobb embriókat választottuk a sikeres terhességhez, genetikai rendellenességek és betegségek nélkül.
Mi az a PGT?
A PGT egy genetikai teszt, amelyet embriókon végeznek a kromoszóma-rendellenességek vagy az öröklött betegségek szűrésére. A rendellenes embriókat azonosítják, és az embriológus kiválaszthatja a genetikailag normális embriókat az átvitelhez.
A páciens kórtörténetétől függően a legjobb PGT-t választják a páciens érdekében.
Az aneuploidia (PGT-A) beültetés előtti genetikai vizsgálata: a kóros kromoszómaszám vizsgálata. Ez a teszt a 46 kromoszómát elemzi, hogy keressen extra vagy hiányzó kromoszómákat, például Down-szindrómát (a 21-es kromoszóma három másolata).
Beültetés előtti genetikai vizsgálat monogén rendellenességekre (PGT-M): a családban előforduló öröklődő genetikai állapotok tesztelése annak elkerülése érdekében, hogy a betegséget átörökítsék csecsemőjükre, beleértve a nemhez kötött betegségeket (pl. cisztás fibrózis vagy Huntington-kór). Előkészületi tesztekre, például vér- vagy nyálmintákra lehet szükség a PGT-M ciklus előtt.
Beültetés előtti genetikai vizsgálat szerkezeti kromoszóma-átrendeződésekre (PGT-SR): genetikai teszt annak kiszűrésére, hogy az embrió kromoszómái rendellenesen rendeződtek-e el, vagy nem megfelelően méretezettek-e. Ezt a kromoszómák kiegyensúlyozott transzlokációi és inverziói okozzák. A kromoszóma-átrendeződések öröklődnek vagy spontán módon megtörténhetnek.
Mi történik a laborban?
Biopsziás eljárás
Az évek során a biopsziás technika fejlődött. Gyakori volt, hogy az embriófejlődés 3. napján végeztek biopsziát, amikor az embrió sejtstádiumban van.
Számos nehézség adódik a biopszia sejtszakaszban történő végrehajtásából. Ha a sejt lizált az eljárás során, egy másik sejtet el kell távolítani. Ez egy invazívabb módszer a 3. napi embriók számára, mivel a legjobb esetben nyolc sejt van jelen.
Nemcsak a technika jelent kihívást, hanem az eredményeket is. Ennek az az oka, hogy csak egy sejt kromoszómainformációit ismerjük. A kockázat kisebb, és az eredmények megbízhatóbbak a blasztociszta stádiumban. A blasztocisztás stádiumot elért embriókat jelenleg előnyben részesítik az embrióbiopsziában (az 5. vagy 6. napon, egyes laboratóriumok még a 7. napon, a megtermékenyítés után).
A blasztociszta kétféle sejtből áll, a polarizált sejtekből a placentát alkotó trofektoderma, az apoláris sejtekből pedig a belső sejttömeg, amelyből a baba fejlődik. A trofektoderma az a sejtréteg, amely a blasztociszta falát tartalmazza; a trofektoderma sejtjei azok, amelyeket a biopsziából nyerünk a genetikai vizsgálathoz.
A blasztociszta biopsziának megvan az az előnye, hogy nagyobb számú trofektoderma sejt van. Ezért egy sejtcsoportot tanulmányoznak; A 3. napon végzett biopsziához képest több információt kapunk. A jó minőségű blastocysta trofektodermája sok sejtet tartalmaz, 100-300 sejt között. A genetikai vizsgálathoz 5-10 sejtre van szükségünk. Mivel a trofektodermának jó számú sejtje van; ez nem káros az embrióra.
A trofektoderma sejtek eltávolítása lehetséges anélkül, hogy befolyásolná a belső sejttömeget, amelyből a későbbi baba fejlődik. Ha körülbelül ennyi sejtet kapunk, akkor olyan eredményt kaphatunk, amely jelzi az embrió teljes kromoszómális állapotát. Fontos, hogy az embrió jó minőségű legyen ahhoz, hogy ennyi sejtet tudjon megszerezni, és az embrió tovább tudjon fejlődni a szándék szerint. Az embrióbiopsziához a fejlődés 3. napján egy kis bemetszést (segített keltetés) végeznek az embriót borító zona pellucidában. Ez megkönnyíti a blasztociszta kikelését a zónából, és megkönnyíti a biopsziát.
Egyes laboratóriumok az asszisztált keltetést ugyanazon a napon végzik, mint a biopsziát. Ez a laboratóriumban alkalmazott rutin protokolltól vagy az embriológustól függ, mindkét módszer biztonságos.
Másrészt az embriológus kimerítő képzése zajlik. Szakképzett embriológus végzi a biopsziát, és minimális az embrió károsodásának lehetősége.
Mindazonáltal mindig fennáll annak a veszélye, hogy az eljárás során az embrió megsérülhet. Ez azért van, mert ez még mindig invazív technika, de jó embrióminőséggel és megfelelő kezekkel a kockázat minimális.
A blasztociszta biopszia egyik korlátja, hogy sok embrió nem éri el a blasztociszta stádiumot, de a tenyésztési körülmények javulása megnövelte a blasztociszták számát az IVF ciklusokban. Sok blasztocisztának nagyobb az esélye a normál állapot eléréséreeuploid embriók.
A csővezeték eljárása
A biopszia elvégzése után az embriológus folytatja a csöveket. Ez egy nagyon alapos technika, amellyel szigorúan steril területen kell dolgoznunk, ügyelve arra, hogy minden, amit használni fogunk, tiszta legyen a külső DNS-től, hogy elkerüljük a szennyeződést.
Mind az embrióbiopszia, mind a szondázási lépések során mindig szükség van egy másik személyre, aki tanúként gondoskodik arról, hogy a kapott embriók és sejtek száma minden lépésben megfelelő legyen.
Miután a sejteket a megfelelő csövükben tároljuk, a fagyasztóban tároljuk, és várják, hogy elküldjék a külső laboratóriumba, vagy magán a klinikán elemezzük, ha van saját genetikai laboratórium. A mintákat a hőmérséklet fenntartása mellett küldik és a lehető leghamarabb a külső laboratóriumba szállítják.
Laboratóriumtól függően az eredmények 2-3 hetes intervallumban érkezhetnek meg.
Az embrió üvegezése
A blasztociszták fagyasztását (vitrifikációs technika) végezzük; az embriókat lefagyasztják, amíg az eredményekre várnak. Amikor az eredmények megérkeznek a laborba, és ha legalább egy euploid embriónk van, a klinika megkezdheti a fagyasztott embriótranszfer ütemezését. Az euploid embriót felolvasztják és normál fagyasztott embriótranszferként viszik át.
Két forgatókönyvünk lehet, amikor az embrióbiopszia elvégzéséről döntünk. Biopszia friss ciklusból nyert embriókról, vagy olyan embriókról, amelyeket már lefagyasztottunk, és szeretnénk tudni a genetikai állapotukat. A második lehetőség kiolvasztást, biopsziát és az embriók ismételt lefagyasztását igényli. Ezt a lehetőséget a páciens előzményei és a lefagyasztott embriók minősége alapján határozzák meg.
Milyen eredményeket találhatunk?
Az eredményeket a biopsziás embriók információival és azok genetikai állapotával együtt küldik el.
Euploid embriók: kromoszómálisan normális, 46 kromoszómával 23 párban. A cél egy olyan euploid embrió átültetése, amely a legnagyobb eséllyel egészséges baba lesz.
Aneuploid embriók: kromoszóma-rendellenes embriók, amelyek nem rendelkeznek megfelelő számú kromoszómával, megnövekedett vetélésekhez, születési rendellenességekhez és IVF-kudarchoz vezethetnek. Az érintett kromoszómák számától függően lehet összetett abnormális vagy kaotikus.
Mozaik embriók: Egy mintát „mozaik”-ként jelentenek, ha a mintavételezett sejtek jelentős részében, de nem mindegyikében találnak kromoszóma-rendellenességet.
Az embrió normális és kóros sejteket is tartalmaz. A mozaik embriók alacsony vagy magas szintűek lehetnek, az abnormális sejtek számától függően. Egyes alacsony mozaikméretű embriók kivételével átültethetők, ebben az esetben mindig ajánlott genetikussal konzultálni.
Nincs eredmény/Nem észleltünk DNS-t: Lehetséges, hogy a laboratórium nem tud eredményt elérni. Ennek oka lehet számos tényező, többek között: rossz embrióminőség, leromlott DNS, sejtek elvesztése a csövesítési eljárás során… Bizonyos esetekben megfontolandó a jó minőségű blasztociszták újbóli biopsziája. A PGT eredményei nagyon pontosak; körülbelül 98% a laboratóriumtól függ. Ez egy magas százalék, amely előnyös lehet a páciens kórtörténetétől függően.
Következtetés
Az embrióbiopszia az évek során fejlődött, biztonságos és hatékony módszer a laboratóriumban. A blasztociszta biopszia biztonságosan elvégezhető szakértő embriológussal és egy erre előkészített laboratóriummal.
Ennek a technikának az előnyei lehetővé teszik számunkra, hogy a legjobb morfológiai és genetikai embriót ismerjük meg, és még egy lehetőséget biztosítunk azoknak a betegeknek, akiknek szükségük lehet rá.
A PGT fő indikációi az előrehaladott anyai életkor, az ismételt beágyazódási kudarc, a korábbi vetélések, a súlyos férfi meddőség és az olyan párok, akiknél fennáll a kockázata annak, hogy öröklött genetikai betegséggel szülessen.
Összefoglalva, a PGT-t integrálni kell az ART-ba, hogy a legjobb eredményeket kínálhassuk a betegek számára. Azonban mindig a klinika szakembereinek segítségével, hogy a legjobb döntést hozhassa meg az adott esetben.
