Anya Hein, embryologiste dans l'équipe d'embryologie forte de dix personnes à ORM Fertility, partage quelques idées sur le temps critique que les embryons des patients passent à croître et à se développer en laboratoire.
Lorsque vous choisissez un fournisseur de fertilité, en choisir un en qui vous avez confiance et avec lequel vous vous sentez à l'aise est une partie essentielle du processus. Les patients se concentrent généralement sur leur médecin individuel, mais ils n'en savent pas toujours plus sur le laboratoire d'embryologie et l'équipe d'embryologie qui travaillera en leur nom lors de la sélection d'un fournisseur de fertilité.
Lorsque les patients en apprennent davantage sur le processus de FIV, ils se rendent compte du rôle extrêmement crucial que le laboratoire d'embryologie et l'équipe joueront dans leur cheminement vers la parentalité.
Chaque équipe de laboratoire et d'embryologie a ses attributs uniques qui peuvent contribuer au succès, il est donc utile pour les patients d'en savoir plus sur cette partie de leur équipe de FIV et d'avoir confiance en eux.
En tant qu'embryologiste, "Gardien des embryons" comme nous nous appelons dans notre laboratoire, je sais qu'il peut sembler que nous voulons garder pour nous toute la magie qui se passe dans notre petit laboratoire.
Il y a généralement un voile de mystère sur ce qui se passe dans le laboratoire de FIV. En tant que patient, vous ne rencontrerez probablement pas l'un de nous au début de votre cycle et vous ne pourrez peut-être même pas nous rencontrer le jour de la récupération de vos œufs. Un patient pourrait se demander; y a-t-il même des embryologistes là-dedans? Que font-ils avec mes gamètes? C'est un acte de foi important que nous demandons à nos patients d'avoir une confiance incommensurable en nous alors que nous prenons soin de leurs espoirs de devenir parents.
Le processus de FIV exige un niveau de stress émotionnel et une immense patience que la plupart d'entre nous n'ont pas encore expérimenté. À chaque étape, nous demandons aux patients d'attendre, d'attendre à nouveau, puis d'attendre à nouveau. Peut-être qu'un petit aperçu du processus pourrait rendre le cœur un peu plus léger et alléger le fardeau de toute cette attente.
Il est important de se rappeler que chaque clinique est différente et que leurs taux de réussite peuvent être influencés par de nombreux facteurs, pas seulement la qualité de leur laboratoire et de leur équipe d'embryologie. Cependant, les techniques générales et le flux des embryons dans chaque laboratoire seront très similaires.
Préparation pour le jour 0
Une patiente, que ce soit une femme qui cherche à concevoir avec ses propres ovules ou une donneuse d'ovules, recevra pendant environ 10 à 12 jours des médicaments spécifiques conçus pour stimuler ses ovaires à produire autant d'ovules que possible. Chaque femme a une cohorte de «pré-œufs» disponibles chaque mois, appelés follicules.
Bien que naturellement, un ou deux de ces follicules seulement se transforment en ovules matures et ovulent, la stimulation permettra à la plupart de ces follicules disponibles de croître, de mûrir et d'être disponibles pour l'insémination en laboratoire. Une fois que les follicules ont atteint une taille désirable, le patient sera «déclenché» pour la récupération des ovules, qui est connu comme le jour 0. Les gamètes (spermatozoïdes et ovules) seront dans le laboratoire d'embryologie du jour 0 au jour 6 (stade blastocyste) ).
Jour 0
Le jour de la collecte des œufs, les œufs et le sperme se rejoindront. Cela peut se produire de deux manières différentes, par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) ou par insémination standard.
ICSI implique l'élimination des cellules de cumulus en forme d'oreiller à l'aide d'une enzyme appelée hyaluronidase afin de visualiser la maturité de chaque ovule avant d'injecter le sperme. À notre clinique, environ 90% des cas utiliseront ICSI pour maximiser le nombre d'ovules fécondés et aider à lutter contre le faible nombre de spermatozoïdes et / ou la motilité.
Les niveaux de maturité de l'œuf peuvent être vus au microscope une fois les cellules du cumulus retirées. Les trois degrés de maturité sont définis comme la vésicule germinale (GV), qui est la plus immature, la métaphase I (MI ou GVBD) et la métaphase II (MII ou PB).
Ce n'est que lorsqu'un œuf semble avoir un corps polaire (stade MII) qu'il peut être fécondé. Il est très utile que les ovules nous indiquent leur maturité afin que nous sachions lesquels sont prêts à accepter un sperme et éventuellement à fertiliser. En moyenne, 75% des œufs collectés seront matures.
Il est important de réaliser que tout ce qui se passe dans le laboratoire et dans la nature est un processus, pas un moment. Lorsque nous effectuons ICSI, on ne sait pas instantanément si ces œufs vont féconder. Nous commençons ICSI et les inséminations après le déjeuner et c'est l'une des dernières choses que nous faisons dans le laboratoire pour la journée. Nous injectons les œufs, chuchotons nos bonnes intentions et les mettons dans leurs incubateurs chauds pour la nuit. En appliquant un timing précis et une patience vigilante, nous sommes convaincus que le processus se poursuivra et que la magie se produira entre ces ovules et ce sperme.
L'insémination standard consiste à répartir les ovules récupérés entre différentes gouttes de milieu de culture puis à les inoculer avec du sperme propre et mobile. Ces œufs ne seront pas dépouillés de leurs cellules cumulus et donc leur maturité ne sera connue que le lendemain, lors du contrôle de fécondation.
Jours 1-3
Le jour 1, environ 16 à 18 heures après avoir introduit le sperme dans les ovules, nous vérifions combien d'entre elles ont fécondé, séparant les ovules fécondés des fécondés et des fécondés anormalement.
La fertilisation n'est visible à nos yeux que quelques heures avant que l'embryon ne commence à se diviser. Pour les ovules qui ont été inséminés avec une insémination standard, nous devons d'abord retirer les cellules du cumulus avant de pouvoir voir la fécondation. La hyaluronidase est une enzyme naturellement présente dans le sperme, de sorte que ces ovules sont maintenant facilement séparés de leur cumulus après une soirée avec beaucoup de sperme.
Lorsque nous regardons le microscope, nous pouvons voir deux petites sphères dans les œufs; qui désignent les autres normalement fécondés du reste. Ces petites sphères sont appelées pronucléi; nous en recherchons deux (2pn). Quand nous en voyons deux, nous savons qu'il y a à la fois de l'ADN paternel (sperme) et de l'ADN maternel (ovule).
Nous prévoyons qu'environ 75 à 80% des œufs matures fertilisent normalement. Ici encore, nous constatons une réduction des œufs par rapport au nombre avec lequel nous avons commencé; généralement moins d'oeufs que les follicules, moins d'oeufs matures que les œufs totaux et maintenant moins d'oeufs fécondés (zygotes) que les œufs inséminés. Il y a plusieurs raisons pour lesquelles les œufs ne fertilisent pas. Il peut y avoir un facteur d'oeuf en raison de l'âge ou de la qualité, ou des facteurs de sperme qui empêchent les ovules de féconder, ou potentiellement une combinaison d'ovule et de sperme.
Après vérification de la fertilisation, nous souhaitons les remettre dans leur incubateur le plus rapidement possible. Là, ils prospèrent et grandissent. Nous les laissons jusqu'au jour 3.
Jours 3-4
Le jour 3, nous évaluons la croissance des embryons à ce point. Si un dépistage complet des chromosomes (CCS) est prévu, nous ferons également éclore un petit trou dans la zone pellucide (coquille) de chaque embryon. Les embryons éclosent naturellement hors de leur zone avant d'être implantés dans l'utérus, c'est donc une partie commune de leur progression; nous donnons juste aux embryons un petit coup de pouce précoce.
Cette éclosion assistée contribuera à faciliter le processus de biopsie le jour 5/6. Environ 70 à 80% des cas de notre clinique utilisent le CSC. Lorsque nous retirons les embryons et les déplaçons dans les milieux appropriés pour ce stade de croissance, nous les classons en fonction du nombre de cellules, du pourcentage de fragmentation et de la symétrie.
Nous voulons que les embryons soient autour de 6 à 8 cellules à ce jour. Les embryons commencent à se distinguer les uns des autres à ce stade. Environ 95% des embryons initiaux continueront de croître jusqu'au jour 3.
Jours 5-6
La prochaine fois que nous regardons les embryons, c'est le jour 5. Sans interruption, entre le jour 3 et le jour 5, les embryons effectuent la transition très difficile d'un embryon au stade de clivage multicellulaire à une morula.
Puis au jour 5/6, ils font la transition d'une morula à un blastocyste.
Le blastocyste est le stade auquel la différenciation commence. Au stade de la morula, les cellules de l'embryon se compactent et décident quelles cellules parmi elles continueront de se diviser et deviendront la masse cellulaire interne (ICM) et laquelle deviendra le trophectoderme. Ce sont les parties cruciales que nous recherchons dans l'embryon au stade blastocyste. L'ICM est le petit groupe de cellules de l'embryon qui devient le bébé et le trophectoderme est le nid d'abeilles qui entoure l'ICM et qui deviendra le placenta.
Une fois qu'ils ont atteint ce stade, l'environnement du laboratoire devient impropre à une croissance future. Ainsi, les jours 5/6 sont les jours où ces embryons sont soit retransférés dans l'utérus, vitrifiés (une méthode de refroidissement rapide de l'embryon, nécessaire pour un stockage prolongé en suspension), soit biopsiés pour les tests CCS, puis vitrifiés. Comme pour tout ce qui est dans la nature, tous les embryons ne se développent pas au même rythme. Il existe une gamme de croissance acceptable; par conséquent, nous recherchons les mêmes signes de viabilité et de croissance le jour 6 que nous le faisons le jour 5.
En raison du niveau élevé d'énergie et de la «perfection» requis pour passer d'un embryon au stade de clivage à un blastocyste, en moyenne, nous n'observons qu'environ la moitié des embryons viables du jour 3 se développer jusqu'au jour 5/6. Certains embryons peuvent atteindre le stade de blastocyste mais ne sont pas de qualité suffisante pour être transférés ou biopsiés.
Il peut y avoir de nombreuses raisons pour lesquelles les embryons ne continuent pas de croître jusqu'au jour 5/6; facteur spermatozoïde, facteur ovarien, manque d'énergie mitochondriale suffisante ou anomalies chromosomiques, la liste ne s'arrête jamais là. Quel que soit le facteur, lorsque nous voyons des œufs abandonner, puis des embryons, il y a une anomalie dans l'œuf ou l'embryon qui l'empêche de continuer dans le processus. Même dans des conditions parfaites, ils peuvent ne pas avoir les mécanismes internes pour continuer à prospérer. Et il est très important de se rappeler que ces embryons ne feraient pas un bébé.
Tout au long du processus de FIV, il faut se rappeler que les follicules ne sont pas égaux aux œufs, les œufs ne sont pas égaux aux zygotes, les zygotes ne sont pas égaux aux blastocystes et les blastocystes ne sont pas égaux aux grossesses. Chaque cycle sera différent et il peut sans aucun doute être extrêmement frustrant pour les patients d'être dans une situation dans laquelle ils ont peu de contrôle. Il peut être utile de commencer un traitement avec des attentes raisonnables, au moins une compréhension de base du processus d'embryologie et une vue d'ensemble. L'objectif final étant un bébé en bonne santé, et chaque bébé en bonne santé n'a besoin que d'un embryon normal qui a pris un départ attentionné.
Soyez assuré que, quelle que soit la durée ou la fin de votre voyage, votre équipe d'embryologie sera là pour prendre soin de vos embryons avec une main qualifiée et un cœur tendre, prête à vous stabiliser à n'importe quelle bosse sur la route.
