Les techniques de reproduction assistée (ART) ont évolué au cours de la dernière décennie pour améliorer les taux de réussite des techniques de FIV. Avec l'introduction du Test Génétique Préimplantatoire (PGT), une nouvelle technique est née dans les laboratoires : la biopsie embryonnaire.
Les techniques de biopsie embryonnaire s'améliorent constamment et sont devenues plus sûres et plus fiables. Les outils et les technologies de l'étude génétique ont changé et ont été remplacés par des techniques plus complexes et plus précises. Ces changements incluent la manière dont la biopsie est effectuée ainsi que le stade de développement de l'embryon auquel la biopsie est effectuée.
Afin d'effectuer le test PGT, nous devons obtenir du matériel génétique de l'embryon pour analyse. Une biopsie est nécessaire et cette procédure consiste en l'élimination des cellules qui seront discutées dans cet article.
Les techniques de PGT et de biopsie embryonnaire nous permettent de procéder à la FIV avec la certitude d'avoir choisi les meilleurs embryons pour une grossesse réussie sans anomalies ni maladies génétiques.
Qu'est-ce que le PGT ?
Le PGT est un test génétique effectué sur des embryons pour dépister des anomalies chromosomiques ou des maladies héréditaires. Les embryons anormaux sont identifiés et l'embryologiste peut sélectionner des embryons génétiquement normaux pour le transfert.
En fonction des antécédents médicaux du patient, la meilleure option de PGT sera choisie pour le bénéfice du patient.
Test génétique préimplantatoire pour l'aneuploïdie (PGT-A) : recherche d'un nombre anormal de chromosomes. Ce test analyse les 46 chromosomes pour rechercher des chromosomes supplémentaires ou manquants, comme le syndrome de Down (trois copies du chromosome 21).
Test génétique préimplantatoire pour les maladies monogéniques (PGT-M) : tester les conditions génétiques héréditaires dans la famille pour éviter de les transmettre à leur bébé, y compris les maladies liées au sexe (par exemple, la fibrose kystique ou la maladie de Huntington). Des tests de préparation comme des échantillons de sang ou de salive peuvent être nécessaires avant le cycle PGT-M.
Test génétique préimplantatoire pour les réarrangements chromosomiques structuraux (PGT-SR) : test génétique effectué pour dépister si l'embryon a des chromosomes disposés anormalement ou n'est pas de taille correcte. Ceci est causé par des translocations et des inversions équilibrées dans les chromosomes. Les réarrangements chromosomiques peuvent être hérités ou se produire spontanément.
Que se passe-t-il au labo ?
Procédure de biopsie
Au fil des ans, la technique de biopsie a évolué. Il était courant d'effectuer une biopsie au jour 3 du développement de l'embryon, lorsque l'embryon est au stade cellulaire.
Plusieurs difficultés découlent de la réalisation d'une biopsie au stade cellulaire. Si la cellule est lysée au cours de la procédure, une autre cellule devra être retirée. C'est une méthode plus invasive pour les embryons au jour 3 car il y a huit cellules présentes dans le meilleur des cas.
Non seulement la technique pose des défis, mais aussi les résultats. En effet, nous ne connaissons les informations chromosomiques que d'une seule cellule. Le risque est moindre et les résultats plus fiables avec le stade blastocyste. Les embryons ayant atteint le stade de blastocyste sont actuellement privilégiés pour la biopsie embryonnaire (au jour 5 ou 6, certains laboratoires même au jour 7, post-insémination).
Le blastocyste se compose de deux types de cellules, les cellules polarisées deviennent le trophectoderme, qui forme le placenta, et les cellules apolaires deviennent la masse cellulaire interne, qui se développe dans le bébé. Le trophectoderme est la couche cellulaire qui comprend la paroi du blastocyste ; les cellules du trophectoderme sont celles que nous obtenons de la biopsie pour l'étude génétique.
La biopsie de blastocyste a l'avantage d'avoir un plus grand nombre de cellules de trophectoderme. Par conséquent, un groupe de cellules est étudié ; nous obtenons plus d'informations par rapport à la biopsie du jour 3. Le trophectoderme d'un blastocyste de bonne qualité a de nombreuses cellules, entre 100 et 300 cellules. Nous avons besoin de 5 à 10 cellules pour l'étude génétique. Comme le trophectoderme a un bon nombre de cellules ; ce n'est pas nocif pour l'embryon.
L'élimination des cellules du trophectoderme est possible sans affecter la masse cellulaire interne à partir de laquelle le futur bébé se développera plus tard. En obtenant environ ce nombre de cellules, nous pourrons obtenir un résultat qui indiquera l'état chromosomique complet de l'embryon. Il est important que l'embryon soit de bonne qualité pour pouvoir obtenir ce nombre de cellules et que l'embryon puisse continuer à se développer comme prévu. Pour la biopsie embryonnaire, une petite incision (éclosion assistée) est pratiquée dans la zone pellucide qui recouvre l'embryon, au jour 3 du développement. Cela facilite l'éclosion du blastocyste de la zone et facilite la biopsie.
Certains laboratoires réalisent l'éclosion assistée le même jour que la biopsie. Cela dépend du protocole de routine utilisé au laboratoire ou de l'embryologiste, les deux méthodes sont sûres.
D'autre part, une formation exhaustive par l'embryologue est réalisée. Un embryologiste qualifié effectuera la biopsie et la possibilité d'endommager l'embryon est minime.
Cependant, il y a toujours un risque que des dommages à l'embryon se produisent pendant la procédure. En effet, il s'agit toujours d'une technique invasive, mais avec une bonne qualité d'embryon et de bonnes mains, le risque est minimisé.
L’une des limites de la biopsie des blastocystes est que de nombreux embryons n’atteindront pas le stade blastocyste, mais l’amélioration des conditions de culture a augmenté le nombre de blastocystes dans les cycles de FIV. Un bon nombre de blastocystes auront de meilleures chances d'obtenir un résultat normal/embryons euploïdes.
Procédure de tubulure
Une fois la biopsie effectuée, l'embryologiste procède à la pose de la tubulure. Il s'agit d'une technique très approfondie avec laquelle nous devons travailler dans une zone strictement stérile, en nous assurant que tout ce que nous allons utiliser est exempt d'ADN externe, pour éviter toute contamination.
Les étapes de biopsie d'embryon et de tube nécessitent toujours une deuxième personne comme témoin pour s'assurer que le nombre d'embryons et de cellules obtenus est correct à toutes les étapes.
Une fois que nous avons les cellules dans leurs tubes correspondants, elles sont stockées dans le congélateur, en attendant d'être envoyées au laboratoire externe, ou analysées dans la clinique elle-même s'il existe son propre laboratoire de génétique. Les échantillons sont envoyés en maintenant la température et transportés dans les meilleurs délais vers le laboratoire externe.
Selon le laboratoire, les résultats peuvent être reçus dans un intervalle de 2 à 3 semaines.
Vitrification d'embryons
La congélation des blastocystes (technique de vitrification) est réalisée ; les embryons sont congelés en attendant les résultats. Lorsque les résultats arrivent au laboratoire, et si nous avons au moins un embryon euploïde, la clinique peut commencer à programmer le transfert d'embryon congelé. L'embryon euploïde sera décongelé et transféré comme un transfert d'embryon congelé normal.
Nous pouvons avoir deux scénarios au moment de décider d'effectuer la biopsie d'embryon. Biopsie sur des embryons issus d'un cycle frais, ou sur des embryons que nous avons déjà congelés et dont nous souhaitons connaître le statut génétique. La deuxième option nécessite la décongélation, la réalisation de la biopsie et la congélation à nouveau des embryons. Cette option sera décidée en fonction des antécédents de la patiente et de la qualité des embryons congelés.
Quels résultats peut-on trouver ?
Les résultats sont envoyés avec les informations des embryons biopsiés et leur statut génétique.
Embryons euploïdes: chromosomiquement normal avec 46 chromosomes en 23 paires. L'objectif est de transférer un embryon euploïde qui aura les meilleures chances de devenir un bébé en bonne santé.
Embryons aneuploïdes: embryons chromosomiquement anormaux qui n'ont pas le bon nombre de chromosomes, ils peuvent entraîner une augmentation des taux de fausses couches, de malformations congénitales et d'échec de la FIV. Selon le nombre de chromosomes impliqués, il peut s'agir d'anomalies complexes ou chaotiques.
Embryons mosaïques: Un échantillon est signalé comme « mosaïque » si une proportion importante, mais pas la totalité, des cellules échantillonnées présentent une anomalie chromosomique.
L'embryon a des cellules normales et anormales. Les embryons mosaïques peuvent être de niveau faible ou élevé, selon le nombre de cellules anormales. Certains embryons à faible mosaïque peuvent être transférés avec des exceptions, dans ce cas, il est toujours recommandé de consulter un spécialiste en génétique.
Aucun résultat/Aucun ADN détecté: Il est possible que le laboratoire ne soit pas en mesure d'obtenir un résultat. Cela peut être dû à divers facteurs, notamment : mauvaise qualité de l'embryon, ADN dégradé, cellules perdues lors de la procédure de tubulure… Dans certains cas, une re-biopsie de blastocystes de bonne qualité peut être envisagée. Les résultats de PGT sont très précis; environ 98% dépend du laboratoire. C'est un pourcentage élevé qui peut être bénéfique selon les antécédents médicaux du patient.
Conclusion
La biopsie embryonnaire s'est améliorée au fil des ans pour devenir une méthode sûre et efficace en laboratoire. La biopsie du blastocyste peut être réalisée en toute sécurité avec un embryologiste expert et un laboratoire préparé pour cela.
Les avantages de cette technique nous permettent de connaître au mieux la morphologie et la génétique de l'embryon, offrant ainsi une option de plus aux patients qui en ont besoin.
Les principales indications de la PGT sont l'âge maternel avancé, les échecs d'implantation répétés, les fausses couches antérieures, l'infertilité masculine sévère et les couples à risque d'avoir un bébé atteint d'une maladie génétique héréditaire.
En conclusion, la PGT devrait être intégrée à l'ART pour offrir les meilleurs résultats aux patients. Cependant, toujours avec l'aide des spécialistes de la clinique pour prendre la meilleure décision dans votre cas particulier.
